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Geno/Grinder 2000
Die Spezialmühle für den mechanischen Zellaufschluss
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In der Forschung bei Biotechnologie/Gentechnik fallen viele und oft unterschiedliche Proben an. Für die DNA/RNA-Extraktion und -Analytik
ist die Probenvorbereitung daher oft der Flaschenhals beim effizienten Entwickeln neuer Pflanzensorten oder der Suche nach gentechnisch
veränderten Organismen (GVO). Alternativ zu enzymatischen Methoden wird das Aufmahlen der Proben angewandt, wobei es für eine gute DNA/RNA-Ausbeute
speziell auf ein effizientes Aufbrechen der Zellwände aller in der Probe befindlichen Zellen ankommt. Bisherige Ansätze die Zellen mechanisch,
d.h. durch Mahlen zu öffnen, basieren auf der Modifikation herkömmlicher Kugel- oder Schwingmühlen. Mit dem Geno/Grinder 2000 steht jetzt die
erste speziell für den Aufschluss von Zellen im 96-er Format entwickelte Mühle zur Verfügung.
Der Einsatz von Mikrotiterplatten oder Einzeltubes, die in einem Rack gehalten werden, ermöglicht das gleichzeitige Aufarbeiten von insgesamt
bis zu 768 Proben. Neben einer guten Ausbeute für die anschließende Extraktion ist die Reproduzierbarkeit enorm wichtig. Durch die vertikale
Auf- und Ab-Bewegung der Probengefäße mit dem Geno/Grinder 2000 wird ein sehr gleichmäßiges Mahlergebnis über alle Tubes und über alle
Mikrotiterplatten gewährleistet.
Entwickelt für den Einsatz in der Agrobiotechnologie zum Aufbrechen von Pflanzenmaterial, wie Samen, Saaten, Blätter, Blüten, Stängel und Wurzeln,
kann der Geno/Grinder 2000 aber auch für Untersuchungen an Mikroorganismen, wie z.B. der Expression bestimmter gentechnisch in die Hefe
eingebrachter Gene oder der Produktion von rekombinanten Proteinen, eingesetzt werden. In dem heute so bedeutungsvollen Gebiet der Proteomics
eignet sich der Geno/Grinder 2000 gleichsam hervorragend für die Probenvorbereitung.
Proben, wie z.B. Pflanzenmaterial, das genügend hart ist, kann mit einer oder zwei Mahlkugeln trocken zerkleinert werden. Je nach Probenmenge
kann hier schon in Mikrotiterplatten mit einem Volumen von 0,8 bis 1ml gearbeitet werden. Hefeproben, die nass in Suspension verarbeitet werden,
haben in der Regel ein größeres Probenvolumen; dafür eignen sich die deep-well Titerplatten, die etwa 1-2 ml fassen können.
Für Anwender mit der Anforderung, größere Volumina oder z.B. die Proben unter Kryobedingungen zu bearbeiten, stehen spezielle Halterungen und
Racks für Einzeltubes von 15ml (max. 48 Proben) oder 50ml (max. 24 Proben) sowie eine Kryostation mit speziellen Adaptern für unterschiedlich
große Titerplatten bzw. Einzeltube-Racks zur Verfügung.
Für den eigentlichen Aufbereitungsschritt wird jedes Einzeltube einer Titerplatte mit dem Mahlgut, (entweder ohne Zusätze oder z.B. mit
einer Pufferlösung) sowie ein oder zwei Mahlkugeln bestückt und in die Mühle eingespannt. Als Mahlkugeln stehen verschiedene Materialien
mit unterschiedlichem Durchmesser zur Verfügung: Glasbeads, Kunststoff, Edelstahl oder div. Keramiken. Als Parameter für die Mahlung sind
die Mahlfrequenz in dem Bereich 500 bis 1700 min-1 und die Mahldauer bis zu 99,59 min einstellbar, wobei die typische Zerkleinerungszeit bei
ca. 2 bis 3 min liegt.
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Einige Applikationsbeispiele:
- Mahlen von Maiskeimlingen und Sojabohnen (eingeweicht) mit Stahlkugeln. Der erhaltene Brei kann dann zur Isolierung der DNA mit den bekannten Tests weiterverarbeitet werden.
- Über Nacht kultivierte Hefen (Pichia und Saccharomyces) werden zum Mahlen mit unterschiedlich großen Glaskugeln in die Wells gegeben, Mahlzyklen 5 bzw. 10 min. Die Größe der gewählten Glaskugeln bestimmt Effektivität der Zellöffnung.
- Aufschluss von Bakterien und Schimmelpilze in Suspension.
- Aufschluss von Blattmaterial zur DNA/RNA-Extraktion (wie auch Proteine und andere Zielsubstanzen) mit Stahlkugeln in Pufferlösung.
- Aufschluss von Samen im trockenen Zustand.
- Proteomics: Zellaufschluss zur Gewinnung von Proteinen.
- Menschliches und tierisches Gewebe sowie Knochenfragmente können zur DNA-Gewinnung mit dem Geno/Grinder 2000 zerkleinert werden.
- High Throughput" PCR-Analytik (bis zu 768 Proben gleichzeitig) und GMO-Analytik.
Weitere Informationen zur Produktgruppe Mahlen / Mischen / Pressen können Sie als Download abrufen.
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